恒河猴实验，《自然》：中国团队恒河猴实验证明中和抗体显著抑制新冠感染

导读恒河猴实验，自然杂志发表文章截。5月26日，国际权威科学期刊《自然》杂志在线发表中国科学家研究成果论文《以SARS-CoV-2受体结合位点为靶点的人类中和抗体》（A human neutralizing antibody targets the rec...

自然杂志发表文章截。

5月26日，国际权威科学期刊《自然》杂志在线发表中国科学家研究成果论文《以SARS-CoV-2受体结合位点为靶点的人类中和抗体》（A human neutralizing antibody targets the receptor binding site of SARS-CoV-2），该论文首次报告了针对SARS-CoV-2中和抗体的非人类灵长类动物实验结果，并取得了积极成果。

该研究发现了两种具有较强新冠病毒（SARS-CoV-2）特异性中和活性的特定人类单克隆中和抗体，其中代号为CB6的抗体在恒河猴动物实验中能够显著抑制病毒感染，显示出治疗和预防效果，具有进行临床转化的价值。

该研究由中国科学院微生物研究所严景华团队、高福团队、王奇慧团队联合中科院武汉病毒所、北京地坛医院、解放军总医院第五医学中心、国家疾病预防控制中心病毒病研究所以及君实生物等多个产学研机构和团队联合攻关。其中，中国科学院微生物研究所严景华、高福、王奇慧，中国科学院武汉病毒研究所生物安全大科学中心袁志明，解放军总医院第五医学中心传染病治疗研究中心王福生为通讯作者。

澎湃新闻注意到，近期包括北京大学生物医学前沿创新中心主任谢晓亮团队，军事科学院军事医学研究院陈薇院士与西湖大学周强实验室等团队都在中和抗体研究方面取得一定进展。中和抗体被国内外科学界普遍认为具有对抗新冠疫情的潜力。

中和抗体是一种治疗性抗体，可以通过中和或抑制病原体的生物学活性来保护细胞免受侵害。凭借特异性和高亲和力特点，中和抗体能够抢先与病毒刺突蛋白（S蛋白）结合，从而阻断病毒与宿主细胞结合，病毒无法感染正常细胞，就很容易被免疫系统清除。

在此次发表的论文中，研究者首先使用单细胞测序技术，从恢复期患者外周血单个核细胞中（PBMC）分离出11个SARS-CoV-2中和性单克隆抗体（mAb），经流式细胞技术（FACS）进行阻断试验分析，筛选出CA1、CB6两种单克隆抗体，可特异性结合SARS-CoV-2刺突蛋白转染的HEK293T细胞，两者均在后续的细胞实验中表现出良好的中和活性。

为进一步测试抗体的治疗与预防效果潜力，研究人员采用SARS-CoV-2感染恒河猴模型的方法，将9只恒河猴分为3组(对照组、预防组和治疗组）,其中对照组注射安慰剂,预防组在病毒感染前一天注射CB6抗体，治疗组则在病毒感染后第1天和第3天注射同剂量CB6抗体。结果显示，在感染后的第4天，治疗组的猴子病毒效价显著降低，病毒滴度比对照组降低了约3个对数，表现出明确的治疗效果。同样，在预防组中，研究人员在猴子感染新冠病毒后仅检测到最低水平的病毒，病毒载量峰值不超过103 RNA 拷贝/mL，表明CB6中和抗体在SARS-CoV-2环境下具有很强的预防保护作用。

值得注意的是，为了避免既往SARS病毒研究中出现的抗体依赖性增强（ADE）效应（如急性呼吸道损伤等），研究团队对备选抗体进行了Fc段改造，引入LALA突变，以降低其介导的细胞毒性作用（ADCC），降低急性肺损伤风险。在动物实验中，治疗组或预防组动物均具有完整的肺泡结构，表现出有限的病理肺损害，表明经过工程化改造的CB6-LALA抗体在显著抑制SARS-CoV-2病毒的同时，减少了感染相关的肺损伤。

此外，研究团队还对中和抗体进行了晶体结构解析，以进一步了解其结合位点与抗病毒机制。结果发现，CB6抗体能够识别结合SARS-CoV-2受体结合域中的ACE2位点（SARS-CoV-2-RBD），从而干扰病毒与其受体之间的相互作用。

澎湃新闻从参与此次研究的单位君实生物处了解到，中科院微生物所与君实生物是全球范围内最早启动新冠中和抗体研究的团队之一。早在疫情暴发之初，双方就携手抗疫，夜以继日地投入到新冠中和抗体的基础研究与产业化工作中。目前，双方利用各自优势平台，已完成临床申报所需的临床前研究，用于GLP毒理研究和临床批次的抗体工艺开发和GMP生产。此外，君实生物也与美国礼来制药签订合作协议，双方计划于第二季度在中国和美国递交临床试验申请并启动临床研究。

他用最残酷的实验毁灭了几代猴子的一生，却也挽救了无数人类婴儿

一般人看来，实验动物最惨的下场莫过于沦为手术台上的解剖样品，或是服下效果不明的药物，死于非命。

但事实上，动物最怕的或许不该是生理实验，而是心理学实验。

身体上的伤害生或死就是一刀的事。

然而心理的创伤却能伴随一生，让它们懂得什么叫做生不如死。

在上个世纪，就有一位名为哈洛的比较心理学家，用残忍的手段摧毁了几代恒河猴的一生。

靠着这些牺牲了的猴子，他从学术界的无名小卒，一跃成为美国最炽手可热的科学家。

哈洛与他的恒河猴

他对恒河猴所做的一切，毫无疑问是残酷的，也一直备受争议。

因此他也被列入20世纪最残忍的科学家之一，是PETA（善待动物组织）最讨厌的心理学家。

然而，当别人问他为什么能这么残忍地对待那些猴子时，他总是直截了当地说：我鄙视猫、讨厌狗，更别说是猴子了，我对这些实验动物毫无感情。

而且耐人寻味的是，这个冷酷的实验竟与“爱”有关，并彻底颠覆今后的育儿方法。

哈利·哈洛（Harry Harlow）与猴子的接触，是偶然也属必然。

1930年，他从斯坦福大学获得心理学博士学位后，便被威斯康辛麦迪逊大学聘为教授。

那个年代，心理学正经历着从纯理论的学科转变成为“真正的科学”的阶段。

通过控制环境和变量，老鼠是最常被用于实验、研究学习行为的动物。

例如我们熟悉的斯金纳，便是以研究老鼠出身并成名。

而我们的主角哈洛的老本行，也是研究老鼠。

斯金纳的老鼠箱

但好巧不巧，哈洛刚当上教授，学校就把原来的老鼠实验室给移除了。

迫于无奈，他也只能重新物色新的实验动物。

那时他就发现，动物园中的猴子，可比怎么教都不会的老鼠要聪明得多。

所以他才在一座废弃厂房中，建起了一座灵长类动物的实验室，从此与猴子结缘。

刚开始哈洛博士只是想研究猴子的学习行为，但很快便出现了一个让他费解的现象。

那时为了防止猴子生病传染，他特意将刚出生不久的小猴子与母亲分开，并实行一猴一笼的隔离喂养。

这种饲养方式也叫做产妇剥夺，意在让灵长类动物早日适应逆境（有争议的）。

哈洛本人也认为这种环境下成长的猴子，要比自然条件下更健壮。

一笼一猴

然而这些幼猴们是吃住无忧了，但哈洛却发现了这些小家伙极其不对劲。

它们经常性地目空一切，神情呆滞地望向远方，还特别喜欢吮手指。

当哈洛重新把小猴子们聚在一起，它们竟手足无措地不懂得如何相处。

除此之外，这些幼猴无一例外的对铺在笼中的毛巾产生了强烈的依恋。

它们喜欢抱着毛巾，或者用毛巾裹住自己。

而且当哈洛想换掉脏掉的毛巾时，猴子们都产生了剧烈的反应，四处乱窜并尖叫。

这种情形让哈洛感到非常奇怪，这不科学啊！

因为当时主流的心理学认为“婴儿对母亲的依恋，是对营养物质的一种回报”。

而且要在母亲解决了子代更重要需求（比如饥饿、饥渴和避免痛苦等）的前提下，婴儿才会对母亲产生依恋的情感。

这就是行为主义心理学中重要的理论——需求减降论。

需求减降论的提出者克拉克·赫尔

无论是动物也好，人也好，都会更加依恋那个给自己提供食物的照顾者。

换句话说，就是“有奶才是娘”，没有奶孩子也会分分钟翻脸。

但是哈洛抚养的这群小猴子，对不产奶的毛巾竟产生了依恋，这又如何解释？

约翰·华生（记住这个人，后面还有他的戏）

而且那时候许多育儿专家都警告父母，千万不能溺爱孩子。

例如著名的心理学家约翰·华生（Watson John）就在他1928年的畅销书中，罗列了温情过剩导致婴儿成年后的各种问题。

他提议，尽量少的亲吻和拥抱孩子，更不要让孩子坐在母亲的大腿上。

就算孩子哭泣，也决不能心软，最多只能握一下手或亲一下额头。

这就是统治了一代美国育儿实践的“哭声免疫法”思想。

如果这个育儿方式是错误的，那该有多少人类小孩受到伤害？

带着这些疑问，哈洛设置了一些列实验。

他给猴子们制作了两种类型的“假”妈妈：一个是用铁丝网制成的“铁丝妈妈”，另一个则是覆盖着软垫的“绒布妈妈”。

这两个妈妈的身体除了大小相同以外，其内部都装有能提供热量的温暖灯泡。

但不同的是，“铁丝妈妈”的胸前会装有一个可以24小时提供奶水的装置，而“绒布妈妈”则没有。

铁丝妈妈与绒布妈妈

如果传统的需求减降论是正确的话，幼猴们肯定会对有奶的“铁丝妈妈”产生依恋。

因为只有它胸前的奶瓶，这才能解决最重要的需求——饥渴。

然而结果却出人意料，是的，“铁丝妈妈”失宠了。

刚开始，所有幼猴都会与两只人工母猴有接触。

但过了最初几天的调适期后，这些刚出生不久的小猴子，无一例外地选择了没有乳汁的“绒布妈妈”。

只有当感到饥饿时，小猴子们才会爬到“铁丝妈妈”身上一小会。

一吃饱，它们便迅速地回到“绒布妈妈”的身边。

铁丝妈妈身上一秒都不想待

后面哈洛还设置了第二个实验，他把一些能够制造巨响、造型可怕的敲鼓机器人放进笼中。

他想看看在惊吓之下，小猴子会作出怎样的选择。

当时小猴子们果然被面前的“怪物”吓得大惊失色，并毫不犹豫地奔向“绒布妈妈”，用尽力气抱紧她。

就像能从“绒布妈妈”身上寻得保护与安慰一样，小猴子们都慢慢平静了下来。

被“怪物”吓坏的小猴子

即使是一出生就只跟“铁线妈妈”待过的猴子，也会优先地选择“绒布妈妈”。

而且就算把“绒布妈妈”拿走，这些小猴子也不会选择喂养它长大的“铁丝妈妈”。

它们反而是趴在窗口上眼巴巴地看着“绒布妈妈”，或是直接蜷缩在地上直瑟瑟发抖。

小猴受到惊吓后趴在窗边看绒布妈妈

这个经典的实验直接证明了，爱的一种重要变量是“触感”，与有无食物无关。

这个实验，在我们今日看来仿佛有点多此一举，因为谁都知道要多给婴儿关爱。

但在那个年代，哈洛的实验却真实地带来了一次育儿概念的改革。

这与过去倡导的只要喂饱孩子就行，“不要溺爱宝宝”的育儿概念是完全相悖的。

身体上的亲昵与接触，对婴儿的成长至关重要。

约翰·华生在拿婴儿做“恐惧反射”实验

例如前文提到的担忧母爱过度的约翰·华生，就在自己的孩子身上贯彻自己的理念，让他们戒断“母爱”。

然而真应了那句“时间是检验真理的唯一标准”，华生的3个孩子成年后都有不同程度的抑郁症。

他们多次试自杀，大儿子才30岁就自杀身亡。

如果没有哈洛的实验，这种错误的育儿理念将会一直错下去，多少婴儿的人生被毁更是不得而知。

在哈洛发表了声明之后，许多孤儿院、社会服务机构和家庭都不同程度地调整育儿方式。

例如现在医生就知道，新生婴儿一出生最好就拿到母亲怀中，而不是一直扔在保育箱。

而孤儿院也懂得，给孩子喂奶最好还要抱起弃婴，多与他们互动。

然而，哈洛的残酷实验可没那么快结束，猴子们也没那么快得到解脱。

因为实验的几年后，哈洛发现那群在人工母猴陪伴下长大的小猴子，无一例外都出现了反常的性格。

当哈洛把这些猴子移除隔离的笼子，放归正常的群居生活中，它们几乎无法与其他猴子相处。

除了呈现出明显的孤僻、抑郁和自闭等症状外，有的猴子甚至出现了强烈的自残性和攻击性。

它们会对周围一切抱有敌意，还经常啃咬自己的手臂，血流不止都不愿意停下，有的猴子甚至将整只手臂都咬下。

此外这些猴子中，所有的公猴都失去了交配能力，有超过一半的母猴不能正常交配。

一只猴子在啃咬自己的四肢自残

然而看着这些痛不欲生的猴子，哈洛想到的却是另一个更残忍的实验——它们是否具备养育后代的能力？

那么问题就来了，这些童年有创伤的母猴并不愿意交配，怎么为人母？

就算是把经验丰富的公猴放进去，母猴们也会拼命抵抗，使公猴满身是伤不得不认怂。

于是，哈洛便给它们特制了一个“强暴架”。

在霸王硬上弓的情况下，这些母猴纷纷受孕，最后共产下了20只幼崽。

然而，这些母猴中有7只对自己孩子表现冷漠、脐带剪短后便不再理睬小猴；

有8只则极其暴力地殴打、虐待自己的孩子；

有4只更是残忍地杀死幼猴，其中一只幼猴是头骨直接被咬碎死亡；

母猴把幼猴按在地上

这20只母猴中，只有一只是极其笨拙地尝试着给自己孩子喂奶。

这个实验结果如果类比到人类身上，结论几乎是绝望的。

仿佛像遗传一样，那些从未曾得到过母爱的人，也被证明了缺乏感情能力去抚养后代。

如果说哈洛以上这个实验虽残忍但尚且影响巨大，那么他后面的实验就开始走向极端了。

在1960年代，生物精神医院的兴起，再加上他当时身患抑郁症，于是他便选择在猴子身上测试抗抑郁药物的作用。

所以在他手下，一大批幼猴的生存目的，就是为了试药而被尽情的摧残。

绝望之井

当时他弄了一个漏斗型的小黑屋，把猴子常年倒吊在里面，底部有个容器可以获取食物。

刚开始猴子会不断地顺着峭壁往上爬，但发现无法逃离后，便开始孤独绝望地安静下来。

哈洛称之为“绝望之井”，可以在短时间内让猴子精神崩溃，呈人类抑郁症状。

但哈洛试过许多药物和利用集体生活对猴子进行治疗，效果都一般。

然而这种研究人类抑郁症的动物模型，也被流传了下来，一直为人类服务。

原本是研究爱的实验，却需要用如此残忍的方式进行。

而哈洛也从来不否认自己的实验是残酷的，但他对此也不曾后悔过。

哈洛曾说过：如果我的论文能拯救人类孩子的话，即使用再多的猴子也并不为过。

在采访中，他甚至直言不讳地回答：我鄙视猫、讨厌狗，更别说猴子了，我对这些实验的动物毫无情感，我只需要他们帮我发论文。

人类的科学史上，不就是用动物的尸体堆起来的吗？

既要有同情心，又要科技发展， 这本身就是一个矛盾的命题。

带着同情心去做残酷实验，或许才是最痛苦的选择。

只是这些实验对猴子们来说是噩梦，但对另一群大猿却是救赎。

*参考资料

劳伦·斯莱特.20世纪最伟大的心理学实验[Z].2007.5

Harry Harlow.Wikipedia.2017.10.16

居维宁."恒河猴"的研究[J].科技导报.1980.01

首个新冠病毒中和抗体恒河猴实验结果发布：有治疗和预防潜力

5月26日傍晚，中国科学院微生物研究所和君实生物（01877.HK）等在《自然》杂志上在线发表了其合作研发的新冠病毒中和抗体在恒河猴的治疗和预防实验结果，这也是首个在非人灵长类动物模型中的抗新冠病毒中和抗体实验报告。该报告初步表明，改造后的中和抗体CB6-LALA能够抑制SARS-CoV-2的感染，观察到治疗和预防的效果。

据报告显示，研究首先从恢复期患者外周血单个核细胞中（PBMC）分离出SARS-CoV-2 中和性单克隆抗体（mAb ），通过单细胞测序技术筛选出两个均能阻断SARS-CoV-2-RBD与在HEK293T 细胞上瞬时表达的hACE2受体结合的单克隆抗体， CA1和CB6。与CA1相比，CB6表现出更强的中和活性。在开始实验前，基于前期的发现，为了防止潜在的抗体依赖性增强（ADE）效应，研究者在CB6的Fc段引入了LALA突变（CB6-LALA）以消除抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用（ADCC），降低Fc介导的肺损伤的风险。

该报告显示，在恒河猴动物模型实验上，证实了中和抗体CB6-LALA的治疗作用和预防潜力。

据显示，在治疗组中（n = 3），受到SARS-CoV-2 感染的动物在感染后第1和第3天给予静脉注射CB6-LALA（50 mg / kg）治疗。对照组（n = 3）的动物在感染后第1天和第3 天给予等体积的磷酸盐缓冲液（PBS）静脉注射。每天评估咽拭子的病毒滴度，直至感染后7天。

研究结果显示，在对照组中，病毒载量在感染后第4天达到峰值水平（约106.5RNA拷贝/ mL），然后自然下降。治疗组的动物在感染后的第4天，CB6-LALA给药后病毒效价显著降低，治疗组病毒滴度比对照组降低了约3个对数。

与此同时，预防组（n = 3）的动物在感染SARS-CoV-2前静脉注射单剂CB6-LALA （50 mg / kg），在观察期间的咽拭子评估中，仅检测到最低水平的病毒滴度，病毒滴度峰值不超过103RNA 拷贝/ mL，表明CB6-LALA在SARS-CoV-2环境下具有很强的预防保护作用。

基于目前的数据分析，研究者们认为，CB6是新型冠状病毒肺炎的潜在治疗可能，值得进一步转化发展。该动物实验结果，也将有助于指导临床试验的方向和设计。

中和抗体是一种可通过中和或抑制病原体（例如病毒）的生物学活性来保护细胞免受侵害的治疗性抗体。抗体可以通过工程化实现药物量产，从而保证临床大量应用。这由此也吸引了全球多个研究团队正在介入研发相关的抗击新冠病毒的中和抗体中。

按照君实生物前期的计划，公司和礼来制药计划在第二季度在美国递交IND申请并启动临床研究。